遺伝子導入 -Nucleofector®-

Nucleofector® の概要

1998年に開発されたNucleofector® テクノロジーは、初代細胞や遺伝子導入の難しい細胞株を導入対象とした初の高効率非ウイルス性遺伝子導入法として、2001年に研究市場に紹介されました。

ヌクレオフェクションは電気パルスにより細胞膜に瞬時に細孔を形成する技術です。Nucleofector® プログラムと細胞種ごとに最適化された専用試薬の開発による総合的な手法を採用し、細胞質へはもちろん、さらに核膜を通して核内への遺伝子の導入を実現しました。これにより、細胞種によっては99%という高導入効率と細胞増殖に依存しない遺伝子導入の実現が可能になりました。

核内へDNAを直接導入

正常ヒト皮膚線維芽細胞（新生児）に2.5 μgのeGFP（高感度GFP）をコードするTMR標識したプラスミドDNAを導入。導入2時間後、細胞は3.5％PFAにより固定され、共焦点顕微鏡で観察された。導入プラスミド（TMR標識）(A)、導入、発現されたGFP (B)、核（DAPI染色）(C)、以上3つを重ね合わせたもの(D)を示した。

優れた遺伝子導入パフォーマンスを実現

高効率の遺伝子導入、高い生存率を実現するために最適化された電気パルスパラメーター
遺伝子導入後の細胞の生理学的安定を保持
残留細胞や残留基質の二次汚染のリスクを最小限に抑制使い捨ての滅菌済みNucleofector® 専用容器（キュベット、ストリップ、プレート）

豊富なアプリケーション

650種類以上の細胞に対応した最適化されたプロトコル - あらゆる細胞種で遺伝子導入が可能に
siRNA遺伝子導入や神経細胞への遺伝子導入などの多彩なアプリケーション
専門家によって審査される雑誌に4000報以上掲載、世界中で数千台のシステム導入実績
接着細胞用のヌクレオフェクションを発明

様々な細胞種、細胞数、異なる基質の遺伝子導入に対応

1つのデバイスで2×10⁴から2×10⁷の細胞のヌクレオフェクションが可能
新しい4D-Nucleofector® システムを使えば同時に異なるプログラム（パルスパラメーター）で処理可能
異なる基質（DNA、RNA、オリゴヌクレオチド、PNA、ペプチド、タンパク質）でも同じプロトコルで実験が可能
1～384回の遺伝子導入をお好みのスループットで実現する様々なデバイスプラットフォーム

概要

Nucleofector®デバイス Nucleofector® テクノロジーは、Nucleofector® 装置および細胞別のNucleofector® キットを組み合わせたものです。
3種類の装置プラットフォームに加え、拡張のための装置も提供しています（下記の表参照）。

	最新型	96-well 拡張	ハイスループット	基本装置
装置	4D-Nucleofector® システム	4D-Nucleofector® 96-well ユニット	HT Nucleofector® システム	Nucleofector® 2b デバイス
ユニット
スループット（サンプル／回）	少数－中程度（1-16）	少数－多数（1-96）	多数（384）	少数（1）
反応容量	20 μl + 100 μl	20 μl	20 μl	100 μl
電極材	導電性ポリマー	導電性ポリマー	導電性ポリマー	アルミニウム
細胞数（小）（20 μl）	2 x 10⁴ – 1 x 10⁶	2 x 10⁴ – 1 x 10⁶	2 x 10⁴ – 1 x 10⁶	-
細胞数（多）（100 μl）	2 x 10⁵ – 2 x 10⁷	-	-	2 x 10⁵ – 2 x 10⁷
DNAベクター量／サンプル	0.2 – 1 μg（20 μl） 1 – 5 μg（100 μl）	0.2 – 1 μg	0.2 – 1 μg	1 – 5 μg
siRNA量／サンプル (濃度 2 nM – 2 μM)	0.2 – 200 pmol（100 μl） 0.04 – 40 pmol（20 μl）	0.04 – 40 pmol	0.04 – 40 pmol	0.2 – 200 pmol
20 μl Nucleocuvette® ストリップ	■	■	-	-
24 ウェル培養プレート	■	■	-	-
96-well ユニットとの互換性	■	-	-	-
品番	AAF-1003B（コアユニット） AAF-1003X（ Xユニット） AAF-1003Y（ Yユニット）	AAF-1003S	AAU-1001	AAB-1001

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ロンザ株式会社 バイオサイエンス事業部