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弊社製品使用上の注意点

初代血液細胞用

ヒト単球用Nucleofector™キット

ヒト単球への最適な遺伝子導入のために、多様なNucleofector™プラットフォーム上でNucleofector™キットと対応する最適化プロトコルが利用可能です。
4D-Nucleofector™、96-well Shuttle™および384ウェルNucleofector™システムでのヒト単球への遺伝子導入に最適なキットは、P3初代細胞用キットです。細胞特異的プロトコルと組み合わせて使用します。Nucleofector™II/2b装置では、ヒト単球特異的キットを使用します。

利点

  • 遺伝子導入効率:最高64%
  • 生存率:最高81%
  • ヒト単球のハイスループットスクリーニングで初めて使用された遺伝子導入技術

用途

  • CD14+ヒト単球細胞に最適
  • DNAとsiRNA遺伝子導入が論文で引用
ヒト単球へのStealth™ siRNAのNucleofection™
ヒト単球へのStealth™ siRNAのNucleofection™
(A) 100nMのフルオロセイン標識したdsRNAオリゴマー (長さや電荷がsiRNAと同じもの) を導入24時間後にフローサイトメーターで解析した。青いカーブは自家蛍光を示す。(B, C and D) Stealth™ siRNA [インビトロジェン社] によりノックダウンした。酸化リノール酸代謝物 (9-HODE類似物, 9-hydroxy-10E, 12Z-octadecadienoic acid ester) 代謝物は、酸化LDLとして動脈硬化プラークに大量に存在し、ケモカインレセプター (CCR2をオフ、およびCX3CR1はオン) の発現調節することにより、ヒト単球からマクロファージへの分化を促進する。さらに、CX3CR1は、マクロファージの冠状動脈平滑筋 (CASMCs) の接着を促す。これらの脂質受容体の発現への影響は、核のペルオキシソーム増殖因子活性化受容体 (PPAR)γの発現を調節する。Down regulation of PPARγ with siRNA (200 nM,[Invitrogen]) によるPPARγの抑制は、受容体のスイッチを劇的に現象させ (BとC)、結果としてマクロファージのCASMCへの接着能が接着アッセイにおいて減少する (D)。(データ提供:Barlic et al., (2006)Circulation 114(8), 807-19 著者の許可により転載)

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