細胞機能

PDELight™ HTS cAMPホスホジエステラーゼアッセイ

PDELight™ HTS cAMPホスホジエステラーゼアッセイキットは、ホスホジエステラーゼ活性の阻害物質の特定およびIC₅₀測定のためのハイスループットスクリーニング向けに設計された、汎用的なアッセイです。このアッセイでは、ホスホジエステラーゼによって、cAMPから加水分解により産出されるAMPを定量するために、安定かつ高感度なルシフェラーゼベースの生物発光システムを採用しています。AMPは直接ATPへ変換され、変換されたATPの分子のひとつひとつに対し、ほぼ1光子に近い光が放出されます。アッセイは、高感度かつ安定であり、再現性があります。他のホスホジエステラーゼアッセイとは異なり、PDELight™キットは放射線、ビーズ、修飾基質、抗体を必要としません。

利点

容易 – 1種類の試薬の添加による反応で測定結果の読み取りが可能
汎用プラットフォーム – すべてのcAMP依存性ホスホジエステラーゼに使用可能
迅速なアッセイ – 3分未満で384ウェルプレートのアッセイを完了
感度 – 96ウェル、384ウェル、または1536ウェル形式で酵素を使用可能
再現性のある、安定なアッセイ – 標準的なZ ‘ 値＞0.8、わずかな誤差、優れた感度

用途

cAMP依存性ホスホジエステラーゼ活性スクリーニング
IC₅₀測定

仕様

AMP範囲：<10 nM～20 μM
ホスホジエステラーゼ：cAMPホスホジエステラーゼ
再現性：標準的な変動係数（CV）は5%未満、標準的なZ ‘値は0.8超
アッセイ時間：1プレートあたり3分未満

2℃ – 8℃, 凍結不可

PDELight™ HTS cAMPホスホジエステラーゼアッセイ

PDELight™ キットプロトコル 3458

高い再現性とバックグランドに対する高シグナル比

高い再現性とバックグランドに対する高シグナル比

同一サンプルの複数回計測によるシグナルとバックグランド。高い再現性が示された。Z’ 値は、0.8より大きく、優れたシグナル/バックグランド S/N比が得られた。

AMP検出の直線性

AMP検出の直線性

PDELight™ キットは、ホスホジエステラーゼにより産生される AMP を定量する。PDELight™ 検出試薬は、20 μM までの AMP を定量し、cAMP による影響を受けない。

PDELight™ アッセイキットによる IC50 値の迅速スクリーニング

PDELight™ アッセイキットによる IC50 値の迅速スクリーニング

上図：PDELight™ キットを用いた化合物ライブラリーのスクリーニング。MMPX と3-IBMX が10 μM で50% 以上の阻害活性をもつ、ホスホジエステラーゼ阻害剤として同定された。
下図：3-IBMX の IC50 測定。PDELight™ キットによって、IC50=6.2 μM と測定された。

オーダー情報

カタログ番号	製品名	製品情報	保管条件	関連情報	サイズ	定価（円）	お問い合わせ
LT07-600	PDELight™ HTS cAMPホスホジエステラーゼアッセイキット PDELight™ HTS cAMP Phosphodiesterase Assay Kit	Material Safety Data Sheet酢酸	2℃ – 8℃, 凍結不可	Instruction Compatible List	500回	45,000

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