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弊社製品使用上の注意点

細胞機能

PDELight™ HTS cAMPホスホジエステラーゼアッセイ

PDELight™ HTS cAMPホスホジエステラーゼアッセイキットは、ホスホジエステラーゼ活性の阻害物質の特定およびIC50測定のためのハイスループットスクリーニング向けに設計された、汎用的なアッセイです。このアッセイでは、ホスホジエステラーゼによって、cAMPから加水分解により産出されるAMPを定量するために、安定かつ高感度なルシフェラーゼベースの生物発光システムを採用しています。AMPは直接ATPへ変換され、変換されたATPの分子のひとつひとつに対し、ほぼ1光子に近い光が放出されます。アッセイは、高感度かつ安定であり、再現性があります。他のホスホジエステラーゼアッセイとは異なり、PDELight™キットは放射線、ビーズ、修飾基質、抗体を必要としません。

利点

  • 容易 – 1種類の試薬の添加による反応で測定結果の読み取りが可能
  • 汎用プラットフォーム – すべてのcAMP依存性ホスホジエステラーゼに使用可能
  • 迅速なアッセイ – 3分未満で384ウェルプレートのアッセイを完了
  • 感度 – 96ウェル、384ウェル、または1536ウェル形式で酵素を使用可能
  • 再現性のある、安定なアッセイ – 標準的なZ ‘ 値>0.8、わずかな誤差、優れた感度

用途

  • cAMP依存性ホスホジエステラーゼ活性スクリーニング
  • IC50測定

仕様

  • AMP範囲:<10 nM~20 μM
  • ホスホジエステラーゼ:cAMPホスホジエステラーゼ
  • 再現性:標準的な変動係数(CV)は5%未満、標準的なZ ‘値は0.8超
  • アッセイ時間:1プレートあたり3分未満

2℃ – 8℃, 凍結不可

PDELight™ HTS cAMPホスホジエステラーゼアッセイ

 
PDELight™ キットプロトコル3458
 

高い再現性とバックグランドに対する高シグナル比

高い再現性とバックグランドに対する高シグナル比

同一サンプルの複数回計測によるシグナルとバックグランド。高い再現性が示された。Z’ 値は、0.8より大きく、優れたシグナル/バックグランド S/N比が得られた。
 

AMP検出の直線性

AMP検出の直線性

PDELight™ キットは、ホスホジエステラーゼにより産生される AMP を定量する。PDELight™ 検出試薬は、20 μM までの AMP を定量し、cAMP による影響を受けない。
 

PDELight™ アッセイキットによる IC50 値の迅速スクリーニング

PDELight™ アッセイキットによる IC50 値の迅速スクリーニング

上図:PDELight™ キットを用いた化合物ライブラリーのスクリーニング。MMPX と3-IBMX が10 μM で50% 以上の阻害活性をもつ、ホスホジエステラーゼ阻害剤として同定された。
下図:3-IBMX の IC50 測定。PDELight™ キットによって、IC50=6.2 μM と測定された。

オーダー情報

カタログ番号 製品名 製品情報 保管条件 関連情報 サイズ 定価
(円)
お問い合わせ
LT07-600 PDELight™ HTS cAMPホスホジエステラーゼアッセイキット
PDELight™ HTS cAMP Phosphodiesterase Assay Kit
  • Material Safety Data Sheet酢酸

2℃ – 8℃,
凍結不可
Instruction
Compatible List
500回 45,000 お問い合わせ